12 просмотров
Рейтинг статьи
1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд
Загрузка...

Метод ифа на гепатит в

ИФА на гепатит С

Достоверность анализа

Чтобы оценить работоспособность защитных функций организма и выявить точные диагностические данные, проводят иммуноферментный анализ. В случаях инфицирования человека обнаруживаются кардинальные изменения в крови и получают результат ИФА на гепатит С положительный.

Метод изучения биологического материала ИФА относят к определению иммунохимических реакций, открывающих взаимосвязи антигенов и антител. В ходе проведения анализа к молекуле антитела химическим способом подсаживают антиген-экзим, служащий маркером, который указывает на компоненты процесса.

К компонентам иммуноферментного анализа относят:

  • антитела:
  • антитела промаркированные;
  • antibodies-attacking-a-virus1-440×264 антиген;
  • субстрат фермента;
  • краситель-индикатор.

Процесс выработки антител и иммуноглобулинов запускается в момент проникания в организм пациента посторонних генов или болезнетворных бактерий.

Задачей иммуноглобулинов считают нейтрализацию антигенов, происходящую при их взаимодействии. В ходе взаимодействия иммуноглобулины формируют комплект антиген-антител, которые имеют количественные и качественные характеристики. Эти значения и изучаются в процессе исследования анализа.

Для регистрации результата в ходе тестирования иммуноферментного анализа у человека забирают биологический материал. Обычно для этих целей используют венозную кровь, но в определенных ситуациях необходим анализ спинномозговой жидкости, стекловидного тела или околоплодных вод беременной женщины. Главной особенностью этого теста является его высокая достоверность, которая составляет порядка 80%.

К плюсам иммуноферментного анализа также относят:

  • метод ИФА превосходит прочие тесты по точности определения важных показателей в десятки раз;
  • для выполнения ИФА не требуется много времени, результаты, подтверждающие или опровергающие наличие вируса в организме, получают довольно быстро;
  • стоимость проведения ИФА доступна большинству категорий населения, в отличие от прочих тестов;
  • проведение ИФА дает возможность обнаружить проблему при начальных проявлениях, что значительно облегчает последующий процесс лечения человека;
  • все стадии проведения этого анализа автоматизированы;
  • высокая степень унификации теста.

К негативным проявлениям данного анализа относят возможность ложноположительных и отрицательных результатов. Сомнительные итоги могут регистрироваться при различных патологических состояниях, беременности и при употреблении медикаментозных средств, которые влияют на выработку организмом антител.

Ложноположительный результат

С помощью проведения иммуноферментного анализа подсчитывается количество антител к вирусу гепатита С. В ходе исследования определяется число этих образований по IgM типу, который соответствует острому течению недуга и IgG, обнаруживаемому при хронической форме.

Антитела IgM регистрируют в течение двух недель после инфицирования организма пациента вирусом гриппа С в острой форме, срок существования этих образований от 3 до 5 месяцев.

Антитела IgG вырабатываются спустя несколько месяцев после поражения организма, но их существование подтверждается в течение десяти лет, даже при условии полного выздоровления пациента.

Отрицательный результат тестирования дает возможность утверждать, что антитела обоих типов отсутствуют в организме и на данный момент гепатит С не обнаружен. Следует учитывать, что если человек заразился в течение последних двух недель, определение патологии невозможно.

Положительный результат теста показывает наличие того или иного типа антител в организме пациента. Данный показатель характеризует инфицирование гепатитом С в острой или хронической форме. Следует учитывать, что фиксация этих образований не дает возможность однозначно указывать на заражение человека, вполне допустимо, что он является только носителем. Бывают случаи, когда при расшифровке данных фиксируется ложноположительный результат.

Это происходит в результате фиксирования лабораторными приборами антител, которые производятся защитной системой человека в ответ на следующие патологии:

  • аутоиммунное воспаление;
  • проникновение в организм пациента прочих инфекций;
  • при беременности.

Статистика проведения иммуноферментного исследования показывает, что ложноположительный вывод регистрируется в 15% всех результатов, подтверждающих наличие вируса. Для беременных женщин данный показатель еще выше.

Причины ложноположительных результатов

Недостоверный вывод тестирования на гепатит С выявляется при сбоях функционирования внутренних органов и технических сбоев, то есть халатного отношения медицинского персонала к своим обязанностям. Ошибки обнаруживаются не более чем в 15% случаев, но их можно избежать, выполняя следующие правила:

Перед сдачей анализа нельзя курить

  • для сдачи анализа необходимо выбирать только проверенные, сертифицированные лаборатории с обученным медицинским персоналом;
  • накануне проведения анализов следует прекратить употребление любых медикаментозных препаратов, если прием лекарства обусловлен состоянием пациента, он должен предупредить персонал лаборатории об этом факте;
  • процедура обычно проводится утром натощак, но перед этим пациенту не следует проявлять излишнюю физическую активность и курить;
  • непосредственно перед проведением анализа рекомендуется определить температуру тела, она не должна превышать норму.

При сомнении в правильности выводов тестирования, назначается повторный анализ. В идеале требуется проведение трех исследований биологического материала на гепатит С.

Если первый тест показал наличие антител в крови пациента, а последующие два не выявили эти образования, можно утверждать, что инфицирования организма вирусом гепатита С нет. Существует ряд заболеваний, которые влияют на результат тестирования крови на наличие вируса гепатита С.

Некоторые патологии сопровождаются выработкой антител, и в этом случае подтверждение наличия вируса гепатита С в организме пациента производится с помощью других методов исследования, так как многократно повторяющиеся ошибки при ИФА анализе не дают гарантии правильного диагноза.

Комплексное изучение с применением исследования биологического материала человека в лабораторных условиях и с использованием инструментальных методов позволит выявить истинную причину недомогания, и исключить гепатит С.

Чаще всего причиной ложноположительного результата анализа являются следующие патологии:

  • инфекционные заболевания острого или хронического типа;
  • рак или доброкачественные новообразования во внутренних органах;
  • заболевания аутоиммунного типа, при течении которых образуются антитела к собственным клеткам организма пациента;
  • туберкулез;
  • малярия;
  • склеродермия;
  • герпес;
  • рассеянный склероз;
  • артрит.

Все перечисленные заболевания являются причиной возникновения сбоев в иммунной системе человека, в результате чего иммуноглобулины начинают вырабатываться с превышением нормы, что и становится помехой для постановки точного диагноза и подтверждения наличия вируса гепатита С в организме пациента.

После соприкосновения с источником инфекции организм человека может успешно подавить воспаление, но антитела, при проведении ИФА, все еще обнаруживались в крови, что стало причиной ложноположительного результата теста.

Довольно часто такой результат тестирования регистрируется у беременных женщин, поэтому без повторного анализа, подтверждение заболевания у такого пациента, не проводится.

Причиной отклонений от нормы становится изменения в организме женщины, которая ждет ребенка. В этот период у нее происходит перестройка внутренних органов, что выражается в следующих процессах:

  • изменяется гормональный фон;
  • в крови формируются специфические белки, вследствие чего меняется ее состав;
  • уровень цитокинов увеличивается.

Помимо перечисленных факторов, влияющих на итоги иммуноферментного анализа, нужно отметить ошибки медицинского персонала, приводящие к обнаружению ложноположительных выводов тестирования:

  • недостаточная квалификация персонала, проводящего забор биологического материала;
  • сбои в функционировании лабораторного оборудования;
  • подмена проб по халатности;
  • ненадлежащее хранение биологического материала (нарушение температурного режима).

При проведении иммуноферментного анализа следует учитывать, что пациент мог недавно получить прививку против гриппа, гепатита или столбняка. Этот факт нужно обязательно довести до сведения лечащего врача или медицинского персонала в лаборатории, чтобы была назначена другая дата исследования.

Что делать, если результат положительный

Регистрация антител в биологическом материале пациента, указывающая на присутствие вируса гепатита С в организме, не всегда является окончательным диагнозом заболевания. Ложноположительные результаты иммуноферментного анализа нередки, и повторные тесты часто опровергают первоначальные выводы.

При положительных анализах нужно обратиться к гепатологу

Нужно понимать, что ИФА тест дает возможность выявить количественные и качественные изменения в биологическом материале человека и определить характер течения заболевания. Делать окончательное заключение об инфицировании гепатитом С можно только после комплексного изучения состояния пациента с применением других лабораторных и инструментальных исследований.

Если положительный результат выявлен надлежащим образом, человеку следует отправиться к специалистам: инфекционисту и гепатологу. Только профильный врач сможет определить, какие тесты необходимо пройти дополнительно до назначения курса терапии

По данным медицинской статистики, в мире инфицировано гепатитом С почти 4% населения, но этот показатель явно занижен, так как многие носители недуга не подозревают о своей проблеме. Поэтому проведение ИФА теста в качестве профилактической меры поможет выявить заболевание на начальной стадии и быстро справиться с болезнью.

ИФА при вирусных гепатитах

Для диагностики вирусного гепатита в рамках медицинского протокола используется несколько лабораторных и инструментальных методик. Одной из самых достоверных является иммуноферментный анализ (ИФА). Метод помогает определить наличие антигена к тому или иному виду вируса. Для этого выполняется стандартная процедура забора крови из вены пациента. Результаты становятся известны уже через неделю после взятия анализа.

Что такое ИФА?

Термин расшифровывается как «иммуноферментный анализ». Он подразумевает определение в крови комплексов антиген-антитело для уточнения этиологии возбудителя. Если это вирус, определяются его виды и подвиды. Антигены — это частички на поверхности клеток возбудителей, связывающиеся с определенными участками антител. Последние являются иммунными молекулами, вырабатываемыми организмом для собственной защиты. Антигены и антитела неповторимы, поэтому определение их структуры с помощью иммуноферментного анализа свидетельствует о наличии конкретной патологии в организме больного. В качестве меток используются ферменты, которые и дали название методике.

Плюсы исследования

ИФА — это высокоточная методика, ее чувствительность достигает 90%. Она помогает проводить скрининг парентеральных гепатитов. Эти заболевания передаются путем инъекции, или через переливание крови. ИФА помогает выявить пациентов, у которых отсутствуют симптомы. Таковыми является большинство хронических больных. Они имеют риск развития цирроза. Его обнаружение на поздних стадиях — это плохой прогноз. Поэтому иммуноферментная методика позволяет своевременно определить заболевание и сэкономить деньги на лечение. ИФА верифицирует этиологию возбудителя и определяет прогноз недуга. Диагностические наборы для нее стоят недорого и длительно хранятся. За быстроту, удобство и точность данных ИФА называют экспресс-методом.

Когда нужен анализ?

ИФА необходим, когда требуется уточнить этиологию вирусного возбудителя для определения схемы лечения. У пациента идентифицируют наличие хронического гепатита B и C, или перенесенного заболевания вирусом подтипа A. Методику нужно применять у членов семьи больного, которые могут заразиться. В инфекционном стационаре анализ выполняется всем пациентам, у которых присутствуют такие симптомы:

  • Желтуха. Желтушность кожных покровов не сопровождается болями в правом подреберье и изменением цвета стула и мочи.
  • Повышение температуры тела. Она вырастает до субфебрильных цифр, иногда наступает лихорадка.
  • Диспепсия. Присутствуют тошнота и рвота, которая не приносит облегчение.
  • Немотивированная слабость.
  • Мелкоточечные высыпания на теле. Это мелкие кровоизлияния вследствие печеночной недостаточности.
  • Тяжесть в правом подреберье. Симптом возникает вследствие растяжения увеличенной печенью собственной капсулы, содержащей множество нервных окончаний.
Читать еще:  Чем артрит отличается от ревматоидного артрита

Основным показанием к выполнению анализа является наличие определенных анамнестических данных. Если пациент ранее страдал инъекционной наркоманией, ему переливали кровь или пересаживали органы — это повод выполнить ИФА.

Подготовка к проведению

Чтобы результаты ИФА были достоверными, требуется предварительно подготовиться. За день до сдачи крови пациенту рекомендуется перестать употреблять жирную и жареную пищу, продукты с высокой концентрацией красителей, стабилизаторов, консервантов, усилителей вкуса и аромата. Нежелательно непосредственно перед выполнением метода заниматься тяжелым физическим трудом и спортивными упражнениями. В день сдачи крови необходимо воздержаться от завтрака. Забор материала натощак позволит получить точный результат. Необходимо исключить из употребления некоторые лекарственные средства. Но самостоятельно это делать не рекомендуется, поскольку есть вероятность вреда для здоровья. Нужна предварительная консультация лечащего доктора.

Методология проведения

Метод ИФА состоит из двух этапов. На первом выполняется забор материала, на втором последний исследуется в лаборатории. Начальный этап проходит стандартно. Ему предшествует подготовка пациента к сдаче крови. В стерильном помещении проводится забор биоматериала, отправляемый в герметических контейнерах на лабораторное исследование. Дальнейшее определение комплексов антиген-антитело происходит с помощью ферментов и тест-систем на специализированном оборудовании. Результат становится известен в течение недели и отправляется пациенту на электронную почту.

Расшифровка показателей

Интерпретация данных подразделяется на качественную и количественную. При качественном определении результаты анализа считаются позитивными, если обнаружены суммарные антитела к определенному подтипу вируса. Выявление anti-НАV IgМ свидетельствует про острый, а anti-НАV IgG — хронический гепатит А. Позитивный маркер НВsAg — признак инфицирования вирусом подтипа В. Он наблюдается в острой и хронической фазах заболевания. Если же выявлен HBCAg, у человека присутствует хронический гепатит С. А anti-НDV сигнализирует про инфицирование подвидом D. Пациенты, у которых определен положительный маркер к вирусу, нуждаются в дальнейшем обследовании для более точной верификации диагноза.

Особенности анализа крови с помощью метода ИФА

Во многих случаях врачам необходимо правильно оценить, насколько хорошо и слаженно работают защитные функции организма пациента. Для точной диагностики различных заболеваний, патологий крови, выявления иммунодефицитов используется специальный анализ крови методом ИФА. Эта аббревиатура расшифровывается как иммуноферментный анализ.

Суть метода ИФА

Этот метод относится к числу иммунохимических реакций, которые основаны на взаимодействии антигенов и антител. К молекуле антитела химически присоединяют молекулу антигена-энзима. Фермент применяют в качестве метки, по которой следят за одним из компонентов реакции.

Основными компонентами ИФА являются:

  • антиген;
  • антитело;
  • антитело, меченное ферментом;
  • субстрат фермента;
  • индикаторный краситель.

Антитела или иммуноглобулины вырабатываются в тот момент, когда в организм попадают какие-то антигены или чужеродные микроорганизмы. Иммуноглобулины входят в контакт с антигенами и обезвреживают их. Связываясь с конкретным антигеном, иммуноглобулины образуют своеобразный комплект: антиген-антитело. У этого комплекта могут быть как количественные, так и качественные показатели. Именно их и определяет с высокой точностью метод ИФА.

В некоторых случаях в качестве исследуемого материала берут спинномозговую жидкость или содержимое стекловидного тела. У беременных женщин исследуют околоплодные воды. Но чаще всего для исследования используется кровь пациента. Она берется из вены строго натощак.

Как подготовиться к анализу?

Перед сдачей анализа следует воздержаться от еды в течение 12 часов. Также в течение 2-3 дней перед анализом не надо есть жирную и жареную пищу, употреблять алкоголь.

Физические нагрузки перед сдачей анализа и стрессы могут не лучшим образом повлиять на результат, поэтому желательно их исключить.

Врач должен знать, не принимал ли пациент накануне каких-то лекарств. Женщинам необходимо сообщить доктору о фазе своего менструального цикла – это тоже имеет значение.

Показания

Врач может назначить сдачу этого анализа при подозрении на следующие заболевания:

  • вирусные заболевания – гепатит, герпес, цитомегаловирус и т.п.;
  • аллергические состояния;
  • заболевания, передающиеся половым путем – хламидиоз, сифилис, микоплазмоз и т.д.;
  • иммунодефицитные заболевания;
  • некоторые онкологические заболевания (например, рак печени).

Также метод ИФА применятся для того, чтобы лечащий врач мог оценить, насколько эффективна назначенная пациенту терапия при лечении того или иного заболевания, каков уровень гормонов у больного. Он также входит в комплексное обследование пациента перед предстоящим оперативным вмешательством.

Расшифровка некоторых показаний анализа ИФА:

Время ожидания результатов зависит от того, какое именно заболевание необходимо диагностировать. Кроме этого, надо учитывать возможности лаборатории, в которой проводится исследование. Некоторые небольшие медицинские учреждения в целях экономии средств ждут, когда кровь сдадут несколько пациентов, чтобы одновременно использовать реактивы.

Но даже с учетом всех вариантов, вы должны получить результаты не позднее чем через 10 дней после забора крови. А в самом быстром случае время ожидания составляет 1 день.

Преимущества анализа

К несомненным плюсам данного метода исследования крови относятся:

  • высокая точность показателей. ИФА превосходит другие методы по чувствительности в 10- 100 раз;
  • высокая скорость проведения – выигрыш во времени получения результата повышается в 30 раз;
  • невысокая стоимость по сравнению с другими методами исследований;
  • возможность раннего диагностирования заболеваний и отслеживания динамики процесса болезни;
  • автоматизация всех этапов исследования;
  • высокая унификация.

К недостаткам можно отнести то, что в отдельных случаях результаты бывают как ложноположительными, так и ложноотрицательными. На достоверность могут повлиять прием пациентом ряда лекарств, различные нарушения в обмене веществ больного и наличие некоторых хронических заболеваний (например, ревматоидный артрит), при которых идет активная выработка организмом антител.

При взятии данного анализа у новорожденного ребенка достоверность также может нарушиться из-за присутствия в крови младенца антител матери.

Метод ПЦР

Для того чтобы перепроверить данные анализа ИФА, уточнить диагноз, пациенту предлагают слать анализ ПЦР. Это диагностика полимеразных цепных реакций. Благодаря данному анализу выявляется микроскопический фрагмент ДНК любого возбудителя болезни, например, вируса гепатита. Достоверность анализа составляет в большинстве случаев 100 %.

Ряд хронических заболеваний с вялотекущим течением анализ ИФА не способен выявить, а методу ПЦР это вполне по силам. При помощи этого анализа выявляются такие заболевания, как мононуклеоз, вирусный гепатит, цитомегаловирус, клещевой энцефалит, различные инфекции, передающиеся половым путем, папилломавирус, кандидоз, ВИЧ.

Материалом для исследования является кровь, а также моча, слюна, слизь, сперма, соскоб эпителия, внутрисуставные жидкости.

Как подготовиться к анализу?

Для того чтобы результат оказался верным, пациенту необходимо правильно подготовиться к сдаче анализа. Если на анализ берется венозная кровь, что за несколько часов до сдачи нельзя ни есть, ни пить. За несколько дней до анализа желательно исключить из своего рациона все жирные и жареные блюда и продукты, которые могут вызвать аллергическую реакцию. Следуют воздержаться от приема алкогольных напитков и курения.

Также не менее, чем за 10 дней до дня диагностики следует прекратить принимать антибактериальные препараты. Если на анализ сдается моча, то перед сбором нельзя мочиться в течение примерно 3 часов. Моча собирается утром в строго стерильную баночку.

Перед сдачей мазка женщинам не следует спринцеваться и применять какие-либо вагинальные свечи.

Сдавать мазок на анализ надо до наступления месячных или спустя 4 дня после их окончания. Ответ пациент получает через сутки после сдачи анализа.

Диагностика вирусных гепатитов методами ИФА и ПЦР

Для подтверждения у пациента диагноза «вирусный гепатит» результаты исследований при помощи ИФА и ПЦР играют ведущую роль. Посредством ПЦР в крови пациента выявляется генетический материал вируса, что дает возможность не только подтвердить диагноз, но и выявить количество вируса, и определить стадию самого инфекционного процесса. С помощью ИФА-диагностики выявляются антитела к вирусам гепатитов.

Диагноз гепатита А врач первоначально ставит после опроса больного, по жалобам, свидетельствующим об остром начале заболевания: сильная тошнота и рвота, боль в животе, развитие желтухи. В фекалиях больного, если они собраны в острой стадии заболевания, можно обнаружить вирус.

При исследовании крови больного на ИФА в острой фазе заболевания будет значительно повышен уровень IgM, а титр IgG останется на высоком уровне даже после выздоровления пациента. Специфические антитела выявляются уже на 3 день острой фазы заболевания и могут сохраняться до полугода. Все современные тест-системы диагностики гепатита А основаны именно на методе ИФА.

Для диагностики вирусного гепатита В врачи стараются использовать как метод ИФА, так и метод ПЦР. Высокий уровень титров IgM и IgG говорит о высокой активности вируса, что характерно для недавнего по времени заражения. К ПЦР диагностике в данном случае обращаются для того, чтобы выявить степень концентрации вируса.

Также оба метода используют при подозрении на гепатит С. Антитела титра IgM будут обнаружены примерно через 8 недель после заражения, титр IgG появится через 12 недель. С помощью ПЦР диагностики врач точно определит стадию инфекционного процесса, количество и качество самого вируса. Также можно определить генотип вируса гепатита С.

Дело в том, что на сегодняшний момент науке известно 11 видов этого вируса. В России наиболее распространены 3 генотипа. Если врач точно знает, каким именно генотипом заражен пациент, то лечение будет направлено именно на борьбу с конкретным генотипом. Все препараты и дозы будут правильно подобраны и шансы на успех, таким образом, значительно возрастут.

Несмотря на то, что метод ИФА был изобретен достаточно давно (впервые такой анализ был проведен в 1971 году), его актуальность не потеряла своего значения и сегодня.

Следует помнить, что необходимость проведения подобной диагностики может установить только врач. И только квалифицированный медицинский работник может правильно интерпретировать результаты анализа и назначить соответствующее лечение. Ни в коем случае не занимайтесь самодиагностикой и тем более самолечением.

Читать еще:  Какие таблетки пить при артрозе

Исследования на вирус гепатита В (ИФА и ПЦР)

Антиген «s» вируса гепатита В (HBsAg)

Поверхностный антиген гепатита В в сыворотке крови в норме отсутствует.
Обнаружение поверхностного антигена (HBsAg) гепатита В в сыворотке подтверждает острое или хроническое инфицирование вирусом гепатита В.

При остром заболевании HBsAg выявляется в сыворотке крови в последние 1-2 недели инкубационного периода и первые 2-3 недели клинического периода. Циркуляция HBsAg в крови может ограничиваться несколькими днями, поэтому следует стремиться к раннему первичному обследованию больных. Метод ИФА позволяет выявить HBsAg более чем у 90% больных. Почти у 5% больных самые чувствительные методы исследования не обнаруживают HBsAg, в таких случаях этиология вирусного гепатита В подтверждается наличием анти-HBсAg JgM или ПЦР.

Концентрация HBsAg в сыворотке крови при всех формах тяжести гепатита В в разгар заболевания имеет значительный диапазон колебаний, вместе с тем имеется определенная закономерность: в остром периоде существует обратная связь между концентрацией HBsAg в сыворотке и тяжестью болезни.

Высокая концентрация HBsAg чаще наблюдается при легких и среднетяжелых формах болезни. При тяжелых и злокачественных формах концентрация HBsAg в крови чаще низкая, причем у 20% больных с тяжелой формой и у 30% со злокачественной антиген в крови может вообще не обнаруживаться. Появление на этом фоне у больных антител к HBsAg расценивается как неблагоприятный диагностический признак; он определяется при злокачественных формах гепатита В.

При остром течении гепатита В концентрация HBsAg в крови постепенно снижается вплоть до полного исчезновения этого антигена. HBsAg исчезает у большинства больных в течение 3 месяцев от начала острой инфекции.

Снижение концентрации HBsAg более чем на 50% к концу 3-й недели острого периода, как правило, свидетельствует о близком завершении инфекционного процесса. Обычно у больных с высокой концентрацией HBsAg в разгар болезни он обнаруживается в крови в течение нескольких месяцев.
У больных с низкой концентрацией HBsAg исчезает значительно раньше (иногда через несколько дней после начала заболевания). В целом срок обнаружения HBsAg колеблется от нескольких дней до 4-5 мес. Максимальный срок обнаружения HBsAg при гладком течении острого гепатита В не превышает 6 месяцев от начала заболевания.

HBsAg может быть обнаружен у практически здоровых людей, как правило, при профилактических или случайных исследованиях. В таких случаях исследуют другие маркеры вирусного гепатита В – анти HBсAg JgM, анти- HBсAg JgG, анти HBеAg и изучают функцию печени.

При отрицательных результатах необходимы повторные исследования на HBsAg.
Если повторные исследования крови в течение более 3 месяцев выявляют HBsAg, такого пациента относят к хроническим больным вирусным гепатитом В.
Наличие HBsAg – довольно распространенное явление. В мире насчитывается более 300 млн. носителей, а у нас в стране – около 10 млн. носителей.
Прекращение циркуляции HBsAg с последующей сероконверсией (образование анти-HBs) всегда свидетельствует о выздоровлении — санации организма.

Исследование крови на наличие HBsAg применяется в следующих целях:

для диагностики острого гепатита В:

  • инкубационный период;
  • острый период заболевания;
  • ранняя стадия реконвалесценции;

для диагностики хронического вирусного гепатита В;

при заболеваниях:

  • персистирующем хроническом гепатите;
  • циррозе печени;

для скрининга и выявления больных в группах риска:

  • больные с частыми гемотрансфузиями;
  • больные с хронической почечной недостаточностью;
  • больные с множественным гемодиализом;
  • больные с иммунодефицитными состояниями, в том числе СПИДом.

Оценка результатов исследования

Результаты исследования выражаются качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBsAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBsAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В, а также при хроническом вирусном гепатите В.

Антитела к ядерному антигену вируса гепатита В JgG (анти- HBcAg JgG )

В норме анти-HBcAg JgG в сыворотке отсутствует.
У больных анти-HBcAg JgG появляются в острый период вирусного гепатита В и сохраняются на протяжении всей жизни. Анти-HBcAg JgG – ведущий маркер перенесенного ВГВ.

Исследование крови на наличие анти-HBcAg JgG применяются для диагностики:

  • хронического вирусного гепатита В при наличии HBs антигена в сыворотке крови;
  • перенесенного вирусного гепатита В.
  • Оценка результатов исследования

    Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие анти-HBcAg JgG в сыворотке крови. Положительный результат – выявление анти-HBcAg JgG свидетельствует об острой инфекции, реконвалесценции или ранее перенесенном вирусном гепатите В.

    Антиген «е» вируса гепатита В (HBeAg)

    В норме HBeAg в сыворотке крови отсутствует.
    HBeAg можно обнаружить в сыворотке крови большинства больных острым вирусным гепатитом В. Он обычно исчезает в крови раньше HBs-антигена. Высокий уровень HBeAg в первые недели заболевания или обнаружение его на протяжении более 8 недель дает основание заподозрить хроническую инфекцию.

    Этот антиген часто обнаруживается при хроническом активном гепатите вирусной этиологии. Особый интерес к определению HBeAg связан с тем, что его обнаружение характеризует активную репликативную фазу инфекционного процесса . Установлено, что высокие концентрации HBeAg соответствуют высокой ДНК-полимеразной активности и характеризуют активную репликацию вируса.

    Наличие HBeAg в крови свидетельствует о высокой ее инфекциозности, т.е. присутствии в организме обследуемого активной инфекции гепатита В, и обнаруживается только в случае присутствия в крови HBs-антигена. У больных хроническим активным гепатитом противовирусные препараты применяются только при обнаружении в крови HBeAg. HBeAg – антиген – маркер острой фазы и репликации вируса гепатита В.

    Исследование крови на наличие HBe-антигена применяется для диагностики:

  • инкубационного периода вирусного гепатита В;
  • продромального периода вирусного гепатита В;
  • острого периода вирусного гепатита В;
  • хронического персистирующего вирусного гепатита В.
  • Оценка результатов исследования

    Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление HBeAg свидетельствует об инкубационном или остром периоде острого вирусного гепатита В или продолжающейся репликации вируса и инфекциозности больного.

    Антитела к антигену «е» вируса гепатита В (anti-HBeAg)

    Анти-HBeAg в сыворотке в норме отсутствует. Появление анти-НВeAg антител указывает обычно на интенсивное выведение из организма вируса гепатита В и незначительное инфицирование больного.

    Эти антитела появляются в острый период и сохраняются до 5 лет после перенесенной инфекции. При хроническом персистирующем гепатите анти-НВeAg обнаруживаются в крови больного вместе с НВsAg. Сероконверсия, т.е. переход HBeAg в анти-НВeAg, при хроническом активном гепатите, чаще прогностически благоприятна, но такая же сероконверсия при выраженной цирротической трансформации печени прогноза не улучшает.

    Исследование крови на наличие анти-НВeAg применяются в следующих случаях при диагностике вирусного гепатита В:

  • установление начальной стадии заболевания;
  • острый период инфекции;
  • ранняя стадия реконвалесценции;
  • реконвалесценция;
  • поздняя стадия реконвалесценции.
  • диагностика недавно перенесенного вирусного гепатита В;
  • диагностика хронического персистирующего вирусного гепатита В.
  • Оценка результатов исследования

    Результат исследования выражается качественно – положительный или отрицательный. Отрицательный результат исследования указывает на отсутствие антител к HBeAg в сыворотке крови. Положительный результат – выявление антител к HBeAg, которые могут свидетельствовать о начальной стадии острого вирусного гепатита В, остром периоде инфекции, ранней стадии реконвалесценции, реконвалесценции, перенесенном недавно вирусном гепатите В или персистирующем вирусном гепатите В.

    Критериями наличия хронического гепатита В являются:

  • бнаружение или периодическое выявления ДНК ВГВ в крови;
  • постоянное или периодическое повышение активности АЛТ/АСТ в крови;
  • морфологические признаки хронического гепатита при гистологическом исследовании биоптата печени.
  • Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (качественно)

    Вирус гепатита В в крови в норме отсутствует.
    Качественное определение вируса гепатита В методом ПЦР в крови позволяет подтвердить наличие вируса в организме больного и тем самым устанавливает этиологию заболевания.

    Данное исследование дает полезную информацию для диагностики острого вирусного гепатита В в инкубационном и раннем периоде развития заболевания, когда основные серологические маркеры в крови у пациента могут отсутствовать. Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Аналитическая чувствительность метода ПЦР составляет не менее 80 вирусных частиц в 5 мкл, прошедшей выявление ДНК пробы, специфичность – 98%.

    Этот метод имеет важное значение для диагностики и мониторинга течения хронического ВГВ. Примерно 5-10% случаев цирроза и других хронических заболеваний печени обусловлены хроническим носительством вируса гепатита В. Маркерами активности таких заболеваний является наличие HBeAg и ДНК вируса гепатита В в крови.

    Метод ПЦР позволяет определять в крови ДНК вируса гепатита В как качественно, так и количественно. Определяемым фрагментом в обоих случаях служит уникальная последовательность ДНК гена структурного белка вируса гепатита В.

    Обнаружение ДНК вируса гепатита В в биоматериале с помощью ПЦР необходимо для:

  • разрешения сомнительных результатов серологических исследований;
  • выявление острой стадии заболевания по сравнению с перенесенной инфекцией или контактом;
  • контроля эффективности противовирусного лечения.
  • Исчезновение ДНК вируса гепатита В из крови – признак эффективности терапии

    Обнаружение вируса гепатита В методом ПЦР (количественно)

    Этот метод дает важную информацию об интенсивности развития заболевания, об эффективности лечения и о развитии резистентности к активным препаратам.
    Для диагностики вирусного гепатита методом ПЦР в сыворотке крови применяются тест-системы, чувствительность которых составляет 50-100 копий в пробе, что позволяет детектировать вирус при его концентрации 5 Х 10^3 -10^4 копий/мл. ПЦР при вирусном гепатите В безусловно необходима для суждения о вирусной репликации.

    Вирусную ДНК в сыворотке крови обнаруживают у 50% больных при отсутствии HBeAg. Материалом для выявления ДНК вируса гепатита В могут служить сыворотка крови, лимфоциты, гепатобиоптаты.

    • Оценку уровня виремии осуществляют следующим образом:
    • менее 2.10^5 копий/мл (менее 2.10^5 МЕ/мл) – низкая виремия ;
    • от 2.10^5 копий/мл (2.10^5 МЕ/мл) до 2.10^6 копий/мл (8.10^5 МЕ/мл) – средняя виремия;
    • более 2.10^6 копий/мл – высокая виремия.

    Существует зависимость между исходом острого вирусного гепатита В и концентрацией ДНК ВГВ в крови больного. При низком уровне виремии процесс хронизации инфекции близок к нулю, при средней – хронизация процесса наблюдается у 25-30% больных, а при высоком уровне виремии острый вирусный гепатит В чаще всего переходит в хронический.

    Читать еще:  Кашель не проходит месяц чем лечить

    Показаниями для лечения хронического ВГВ интерфероном-альфа следует считать наличие маркеров активной репликации вируса (выявление HBsAg, HBeAg и ДНК ВГВ в сыворотке крови в течение предшествующих 6 месяцев.).

    Критериями оценки эффективности лечения служат исчезновение HBeAg и ДНК ВГВ в крови, что обычно сопровождается нормализацией уровня трансаминаз и долговременной ремиссией заболевания, ДНК ВГВ исчезает из крови к 5-му месяцу лечения у 60%, к 9-му месяцу – у 80% больных. Снижение уровня виремии на 85% и более к третьему дню от начала лечения по сравнению с исходным служит быстрым и достаточно точным критерием для прогнозирования эффективности терапии.

    Диагностика вирусных гепатитов В, С и ВИЧ: почему бывают ошибки?

    Недавно в горячем появился пост об ошибочном результате на гепатит С. Одни методы называют плохими, говорят об ошибках лаборатории. Я мало в чем разбираюсь, но диагностика вирусных гепатитов и ВИЧ одна из тех немногих тем, в которых я что-то смыслю, поэтому и хочу поделиться с вами: какие анализы показывают окончательный диагноз, какие имеет смыл пересдавать, когда и какие анализы сдавать, чтобы получить точный результат. Немного больше ясности для сохранения ваших нервов)

    Первый пост, не ругайте сильно. Итак, поехали.

    Гепатит С – вирус, поражающий печень.

    Какой анализ сдается для скрининга?

    Смысл скрининга – проверить как можно больше людей как можно быстрее и дешевле. В качестве скрининга на гепатит С используется анализ Anti-HCV-total (суммарные антитела к антигенам вируса гепатита C) методом ИФА. Антитела – это белки иммуноглобулины крови человека, которые иммунная система продуцирует в ответ на вирусы, бактерии, вредные и не очень вещества (аллергия) а иногда и на собственные клетки (аутоиммунные заболевания). Каждое антитело специфично, оно связывает и нейтрализует только один вид бактерий или вирусов и не действует на другие. Таким образом, анализ Anti-HCV-total ищет не сам вирус, а белки крови, которые сталкивались с вирусом гепатита С или с чем-то похожим на этот вирус. Этим и объясняется низкая специфичность такого анализа – только у 90% получивших положительный результат на Anti-HCV-total действительно есть или был гепатит С. Не стоит также забывать, что 30% людей, заразившихся гепатитом С, спонтанно от него излечиваются в течении первых полугода болезни, а антитела к этому вирусу могут оставаться у них годами. В итоге имеет то, что меньше 2/3 положительных результатов теста действительно говорят о гепатите С. Является ли та ложноположительная 1/3 ошибкой врача или лаборатории? Нет, это погрешность самого метода.

    Что сдается для подтверждения болезни?

    Для подтверждения или опровержения диагноза после положительного результата скрининга сдается 2 анализа: анализ на расширенный спектр к антителам тем же методом ИФА и анализ на РНК самого вируса методом ПЦР.

    Первый из них ищет уже не общие антитела к антигену HCV, а антитела к структурным (ядерным) белкам Cor-1 и Cor-2 и неструктурным NS3, NS4, NS5. Если часть из них отрицательна, то предыдущий ИФА такого анализ можно считать ложноположительным. Самый частый белок, который «фонит», искажая данные анализа, это NS5 – видимо, он очень похож на какой-то другой белок, продуцируемый нашей иммунной системы.

    Второй анализ выполняется методом ПЦР, при котором ищут уже не белки крови человека, а сам вирус, точнее его РНК. В настоящий момент такие системы очень чувствительны, они видят вирус уже при 10-60 копиях в 1мл крови, для сравнения, обычная вирусная нагрузка у больного – сотни тысяч или миллионы копий; т.е. система вирус не пропустит. В теории данный анализ обладает 100% специфичностью — при правильном проведении ПЦР он не может быть ложноположительным, в отличие от ИФА. На практики же, при несоблюдении инструкций и правила чистых комнат, в пробирку с вашей кровью может попасть частичка вируса инфицированного, и тогда анализ окажется недостоверен. Именно поэтому его не используют для скрининга – если бы лаборатории загрузили таким анализом, не обучая сотрудников и не меняя сами лаборатории, то такие ошибки вполне могли случаться довольно часто. Второй причиной неиспользования данного анализа для массового выявления гепатита С – его дороговизна (необходимы более дорогие реактивы, больше лаборантов, больше времени и т.д.). Оба недостатка принципиально преодолимы и, в связи с тем, что появились эффективные лекарства против гепатита С, а значит здоровых людей с Anti-HCV+ и РНК- будет становиться всё больше, я надеюсь, рано или поздно, мы перейдем на ПЦР диагностику в качестве скрининга гепатита С.

    Для тех же, у кого ИФА показал + без ПЦР-диагностики диагноз гепатит С поставить не могут: пока не нашли сам вирус – нет и болезни!

    Ниже приведен график появления в крови РНК гепатита С и антител от даты заражения. Анализ на РНК окажется достоверным уже 10 дней после заражения, анализ на антитела – через 1,5-3 месяца.

    ВИЧ – вирус иммунодефицита человека

    Какой анализ сдается для скрининга?

    В качестве скрининга на ВИЧ используется анализ HIV Ag/Ab Combo методом ИФА. Современные тест-системы ИФА на ВИЧ отличаются от ИФА на гепатит С тем, что ловят не только антитела к вирусу (Ab), но и антиген самого вируса (Ag), отсюда и название — Combo. Антиген – этот небольшой кусочек самого вируса, который является раздражителем нашей иммунной системы. По таким чужеродным антигенам она и вырабатывает специфические тела. Метод антитела+антиген позволяет диагностировать ВИЧ на ранних стадиях, но это не избавляет ИФА от его главного недостатка – специфичности 98%, не 100%. Ситуация аналогична гепатиту С – не все положительные анализы первичного ИФА являются достоверным свидетельством болезни, но ИФА ВИЧ показывает неверные результаты только в 2%, а не в 35%, как в случае с гепатитом, ведь от ВИЧ, к сожалению, пока нельзя излечиться. И это снова не ошибка врача или лаборатории, а проблемы метода.

    Что сдается для подтверждения болезни?

    К счастью, здесь система продумана. В случае положительного или сомнительного ИФА лаборатория сразу отправляет пробирку на дополнительный анализ, который называется Иммуноблот. Иммуноблот ищет больше десятка специфических белков, которые иммунная система продуцирует в ответ на ВИЧ: один белок может «фонить» и давать неверный анализ, но если обнаружено множество белков – тут диагноз можно подтвердить. Полностью положительный иммуноблат трактуется как наличие ВИЧ-инфекции.

    В случае сомнительного или положительного иммуноблота человек приглашается в СПИД-центр, где ему берут кровь на определение РНК самого вируса ВИЧ-1 методом ПЦР – этот анализ окончательно подтвердит или опровергнет диагноз, если до того были какие-то сомнения.

    Современные тест-системы 4-го поколения HIV Ag/Ab Combo позволяют получить достоверный результат через 4-6 недель после предполагаемого заражения. Если есть серьезные опасения заражения (незащищенный половой акт с партнером ВИЧ+, использование одного шприца с ВИЧ-позитивным), то существует возможность начать постконтактную профилактику в течении 72 часов и снизить риск заражения ВИЧ.

    Гепатит В – ещё один вирус, поражающий печень

    Какой анализ сдается для скрининга?

    В случае гепатита В ищутся не антитела нашей иммунной системы, а кусочек самого вируса, его поверхностный антиген HBsAg или «австралийский» антиген. Данный анализ вполне точен, на него не влияют специфические белки крови и, в принципе, положительный результат HBsAg говорит о наличии острого или хронического гепатита В. В теории специфичность теста равна 100%, но человеческий фактор никто не исключал.

    Что сдается для подтверждения болезни?

    В случае обнаружения HBsAg сдаются дополнительные анализы, которые позволяют охарактеризовать стадию болезни: антиген HBеAg и антитела Anti-HBс-total, Anti-HBс IgМ , Anti-HBе (они также могут называться HBсAb, HBсAb IgМ, HbeAb), а также ПЦР-диагностика ДНК HBV.

    Это, в данном случае, неправильный вопрос. Если есть основания полагать, что произошел риск по гепатиту Б, а прививки от него нет, то необходимо её сделать в первые дни/недели после риска. Перед вакцинацией одновременно сдаются 3 анализа: HBsAg (показывает, есть ли сейчас гепатит), Anti-HBsAg (показывает, есть ли защитные антитела к гепатиту) и Anti-HBc (показывает, был ли когда-то контакт с вирусом). Интерпретация следующая:

    1. HBsAg+ Анти-HBsAg- Анти-HBc+ есть гепатит В, нужно дообследоваться;

    2. HBsAg- Анти-HBsAg+ Анти-HBc+ был острый гепатит В, произошло выздоровление, есть защитные антитела, больше никогда не заболеете;

    3. HBsAg- Анти-HBsAg- Анти-HBc+ либо выздоровление без иммунитета, либо человек находится в точке (см. график), когда красная сплошная линия ещё не успела превратиться в красную пунктирную;

    4. HBsAg- Анти-HBsAg- Анти-HBc- никогда не болели гепатитом, бежим делать прививку по схеме 0-1-6 или ускоренную 0-1-2-12 (числа — это месяцы, 0 — первая вакцинация);

    5. HBsAg- Анти-HBsAg+ Анти-HBc- никогда не болели и никогда не заболеете гепатитом, прививка уже есть.

    На графике показан хороший вариант течения гепатита В: острая стадия закончилась выздоровлением с формированием пожизненного иммунитета, что и происходит у 95% заразившихся гепатитом В взрослых. У оставшихся 5% пунктирные линии Anti-HBsAg и Anti-HBeAg не появляются, а уровень ДНК, HBsAg и HBeAg остается стабильно высоким – это хроническая стадия гепатита В. Такой диагноз можно поставить, только если имеются 2 положительных анализа на основной маркер HBsAg, между которыми прошло полгода и более.

    Надеюсь, теперь стало чуть понятнее про разницу между антителами, антигенами и ДНК/РНК вирусов. Всем не болеть и внимательнее читайте названия анализов!

    Если кому интересно, могу сделать пост о пред/пост контактной профилактике и рискам гепатитов В, С и ВИЧ — они разные, и на эту тему много мифов засели в головах.

    Ссылка на основную публикацию
    Adblock
    detector